參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱(chēng)：單核細(xì)胞增生李斯特菌PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱(chēng)：Listeria monocytogenesPCR
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
?單核細(xì)胞增生李斯特菌PCR檢測(cè)試劑盒原理是由一對(duì)引物介導(dǎo)，能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增，經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴(kuò)增效率＝倍，使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品僅用于科研特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線(xiàn)放線(xiàn)桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由（1）高溫變性模板；（2）引物與模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán)，通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng)，使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是：
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下（通常為93℃-94℃）使其變性解成單鏈；
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合，兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短；
耐熱的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃將單核苷酸從引物的3’端開(kāi)始摻入，以目的基因?yàn)槟０鍙?’→3’方向延伸，合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
芴甲氧羰基-S-乙酰氨甲基-L-半胱氨酸/Na-芴甲氧羰酰基-S-(乙酰基-氨甲基)-L-半胱氨酸/FMOC-S-乙酰氨甲基-L-半胱氨酸/Fmoc-Cys(Acm)-OH特純，98%5克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，86060-81-32～8°C

芴甲氧羰基-N-三苯甲基-L-組氨酸/N-Fmoc-N'-三苯甲基-L-組氨酸/Nα-FMOC-N(IM)-TRITYL-L-組氨酸/N-芴甲氧羰基-N'-三苯甲基-L-組氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-N'-三苯甲基-L-組氨酸/Fmoc-His(Trt)-OH特純，98%5克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，109425-51-62～8°C

芴甲氧羰酰基-N-甲基-L-纈氨酸/Fmoc-N'-甲基-L-纈氨酸/Fmoc-N-Me-Val-OH特純，98%1克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，84000-11-32～8°C

芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-酪氨酸/Fmoc-O-叔丁基-L-酪氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-叔丁基-L-酪氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-O-叔丁基-L-酪氨酸/Fmoc-Tyr(tBu)-OH特純，98.5%5克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，71989-38-32～8°C

芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-蘇氨酸/Fmoc-O-叔丁基-L-蘇氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-叔丁基-L-蘇氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-O-叔丁基-L-蘇氨酸/Fmoc-Thr(tBu)-OH特純，98%1克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，71989-35-02～8°C

馬尿酰-組氨酰-亮氨酸/N-Hippuryl-His-Leu hydrateBR，98%25毫克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，207386-83-2保存：-20℃

O-乙酰-L-絲氨酸鹽酸鹽/O-乙酰-L-氫氯化絲氨酸/O-Acetyl-L-serine hydrochlorideBR，98%10毫克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，66638-22-0保存：-20℃

N,N'-二琥珀酰亞胺基碳酸酯/N,N'-琥珀酰亞胺基碳酸酯/N,N-琥珀酰氨基碳酸酯/N,N'-碳酸二琥珀酰亞胺基/N-氫氧化琥珀酰亞胺/DSC高純，98.5%5克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，74124-79-1RT

氨基酸螯合鐵/10% Iron chelate高純50克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，RT

DL-高半胱氨酸/DL-2-氨基-4-巰基丁酸/DL-類(lèi)半胱氨酸/DL-巰基丁氨酸/DL-同型半胱氨酸/同型半胱氨酸/升半胱胺酸/2-氨基-4-巰基丁酸/DL-HomocysteineBR，95%1克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，454-29-5保存：-20℃

Nα-FMOC-Nω-PBF-L-精氨酸/Fmoc-Pbf-精氨酸/N-芴甲氧羰酰基-2,2,4,6,7-五甲基二氫苯并呋喃-5-磺酰-L-精氨酸/Fmoc-保護(hù)基精氨酸/芴甲氧羰酰-精氨酸/FMOC-NOMEGA-2,2,4,6,7-五甲基苯并呋喃-5-磺酰基-L-精氨酸/Fmoc-Arg(Pbf)-OHBR，98%5克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，154445-77-9保存：-20℃

FMOC-L-谷氨酸5-叔丁酯/芴甲氧羰基-L-谷氨酸5-叔丁酯/芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-谷氨酸/Fmoc-O-叔丁基-L-谷氨酸/Fmoc-Glu(OtBu)-OHBR，98%5克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，71989-18-92～8°C

FMOC-S-叔丁基-L-半胱氨酸/FMOC-硫代叔丁基-半胱氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-S-叔丁基-L-半胱氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-硫代叔丁基-L-半胱氨酸/Fmoc-Cys(tBu)-OHBR，98%5克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，67436-13-92～8°C

甘氨酸叔丁酯鹽酸鹽/鹽酸甘氨酸叔丁酯/氨基乙酸叔四丁酯鹽酸鹽/甘氨酸叔丁基酯鹽酸鹽/Glycine tert butyl ester hydrochlorideBR，98%5克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，27532-96-3RT
單核細(xì)胞增生李斯特菌PCR檢測(cè)試劑盒SOB培養(yǎng)基粉劑，1LD-2-Aminobutyric acid 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

SOB培養(yǎng)基(pH7.0)，500mlNA 質(zhì)量規(guī)格：>98%

SOC培養(yǎng)基粉劑，1LN-(tert-Butoxycarbonyl)-(S)-(+)-3-pyrrolidinol 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

SOC培養(yǎng)基(pH7.0)，500mlAcetoacetanilide 質(zhì)量規(guī)格：>96%,BR

SB固體培養(yǎng)基粉劑(Super Broth)，1L5-[(1E)-2-(3,4-Dimethoxyphenyl)ethenyl]-1,3-benzenediol 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

SOB固體培養(yǎng)基粉劑，1L2-Amino-4-cyanopyridine 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR，來(lái)源馬心

SOC固體培養(yǎng)基粉劑，1L5(6)-Aminofluorescein 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR，來(lái)源心

TB固體培養(yǎng)基粉劑(Terrific Broth)，1LN-(2-Hydroxyethyl)ethylenediaminetriacetic acid 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR，來(lái)源豬心
注意事項(xiàng):
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
２．純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
３．產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗(yàn)一下是否滿(mǎn)意，然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存，從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi)，并且要充分混勻。